Cercetător Știițific gr. I Dr. Neagu Monica

Cercetător Știițific gr. I Dr. Neagu Monica
Institutul Naţional “Victor Babeş”, Bucureşti
Spitalul Clinic ”Colentina”, Bucureşti

Profilul mutational in cancerele de piele
Autori: Monica Neagu1,2,3, Carolina Constantin1,2, Elena-Georgiana Dobre1, Mihaela Surcel1, Adriana Munteanu1, Sabina Zurac2,4

1.Laborator Imunologie, Institutul National de Patologie Victor Babes, București, România
2.Serviciu Anatomie Patologică, Spitalul Clinic Colentina, București, România
3.Școala Doctorală, Universitatea București, România
4.Facultatea de Medicină și Farmacie Carol Davila, București, România

Cuvinte cheie: melanom, carcinom scuamocelular, mutații, calea de semnalizare EGFR-RAS-RAF

Introducere și Obiective. Profilul mutațional al genelor implicate în codificarea proteinelor care controlează calea EGFR-RAS-RAF poate descrie noi markeri genetici și noi ținte terapeutice în cancerele de piele.
Materiale și metode: Probe arhivate în parafină de melanom cutanat, nevi benigni sau carcinoame scuamocelulare (CSC) au fost evaluate folosind droplet digital PCR (ddPCR) în comparativ cu probele de piele normală. Probele au fost diagnosticate histo-patologic și imunohistochimic. Statusul mutațional a fost evaluat folosind primeri pentru mutațiile BRAF V600, NRAS G12/G13, NRAS Q61, KRAS Q61 și delețiile exonului 19 EGFR în conformitate cu instrucțiunile producătorului.
Rezultate: Nevii melanocitari se caracterizează prin mutații BRAF V600E și NRAS G12/G13, mutatții care coexistă și în melanoame. Mai mult, majoritatea nevilor benigni investigați (peste 80%) au mutații majore în calea de semnalizare MAPK.
Profilul înalt mutagen al nevilor benigni este corelat cu expresia ridicată a proteinelor ciclului celular care reglează ciclul celular menținându-l în starea arrested. Mutațiile BRAF s-au asociat semnificativ cu indicele Breslow (BI) și infiltratul limfocitar tumoral, în timp ce mutațiile NRAS s-au corelat cu BI și indicele mitotic. CSC se caracterizează printr-un profil mutațional scăzut, doar 1% din probe prezentând deleții ale exonului 19 EGFR.
Concluzie: Tehnologia ultrasensibilă a ddPCR poate detecta mutații chiar și în pielea normală, iar studiul prezentat oferă validarea unei noi tehnologii utilizată pentru profilul mutațional al cancerelor de piele.
Studiu finanțat de proiectele PN-III-P4-PCE-2021-0549 (PCE9/2022), NASR, [PN 23.16.01.03], COST Action CA21108 – European Network for Skin Engineering and Modelling.

Mutational profiling in skin cancers
Authors: Monica Neagu1,2,3, Carolina Constantin1,2, Elena-Georgiana Dobre1, Mihaela Surcel1, Adriana Munteanu1, Sabina Zurac2,4

1.Immunology Laboratory, Victor Babes National Institute of Pathology, Bucharest, Romania
2.Pathology Department, Colentina Clinical Hospital, Bucharest, Romania
3.Doctoral School, University of Bucharest, Bucharest, Romania
4.Carol Davila University of Medicine and Pharmacy, Bucharest, Romania

Keywords: melanoma, squamous cell carcinomas, mutations, EGFR-RAS-RAF pathway

Introduction & Objectives: The mutational profiling of genes involved in the encoding of proteins that control EGFR-RAS-RAF pathway can depict new genetic markers and new therapy targets in skin cancers.
Materials & Methods: Paraffin embedded samples of skin melanoma, benigni nevi, or squamous cellular carcinomas (SCC) were evaluated using droplet digital PCR (ddPCR) in comparison to normal skin samples. Samples were diagnosed using histology and immunohistochemistry evaluation. The mutational status was assessed using primers for BRAF V600, NRAS G12/G13, NRAS Q61, KRAS Q61 and EGFR exon 19 deletions Screening Assays according to manufacturer’s instructions.
Results: Melanocytic nevi are characterized by hotspot alterations affecting BRAF or NRAS (mutations BRAF V600E and NRAS G12/G13) that co-exist also in melanomas. Moreover the majority of the investigated benign nevi (over 80%) have driver mutations in the MAPK signaling pathway. The highly mutagenic profile of benign nevi is correlated with high expression of cell cycle proteins that drive the melanocyte’s cell cycle in an arrested stage. BRAF mutations associated significantly with Breslow index (BI) and tumor infiltrating lymphocytes, whereas NRAS mutations correlated with BI and the mitotic index. SCC are characterized by low mutational profile with only 1% of the samples showing EGFR exon 19 deletions.
Conclusion: The ultrasensitive technology of ddPCR can detect mutations even in normal skin, therefore our study presents a technology that can aid the molecular profiling of skin cancers.
Acknowledgement. Study financed by grants PN-III-P4-PCE-2021-0549 (PCE9/2022), NASR, [PN 23.16.01.03], COST Action CA21108 – European Network for Skin Engineering and Modelling.

Scurt CV

CSI Dr. Monica Neagu – Șef laborator Imunologie, Abilitare în Imunologie, Conducator de doctorat Școala Doctorală a Facultății de Biologie, Universitatea din București, Coordonator doctorat University of Natural Resources and Life Sciences, Wien, Austria, University of Crete, Greece; CSI în Sectia de Anatomie-Patologică, Spitalul Clinic Colentina; Președinte al Societății Române de Imunologie, membru al World Academy of Science; 2019-2024 Top 2% World scientists.
Director de Proiect pentru proiecte internaționale: Bilateral Cooperation România-China 511/2011 Biomarker discovery in digestive tract cancer and skin melanoma using proteomic approaches (Beijing Institute of Genomics), Bilateral Cooperation România-Grecia project no. 7285/02 Immunomodulating potential of prothymosin alpha [….] (University of Athens), NATO SfP 982838/2007 Development of a novel immunoassay for the very early detection of Biothreatening Bacterial Infections (University of Tuebingen, University of Athens); Study of the healing and immuno-modulating activity of new in situ gelling formulations (Department of Pharmacy, University of Salerno) și membru al echipei de cercetare în proiecte internaționale FP7, ERA-NET, Horizon2020. În prezent este membru al Comitetului de management al proiectelor Orizont2020 COST CA16120 – European Epitranscriptomics Network (EPITRAN), CA18125 – Advanced Engineering and Research of Aerogels for Environment and Life Sciences (AEROGELS) și ECO-Aerogels.
Are specializare în autoimunitate la Sandoz Pharma Ltd., Basel. În perioada 2010-2013 a fost membru al Comisiei pentru Terapii Avansate – EMA.
În ultimii 5 ani a condus sau a fost implicată în peste 10 proiecte finanțate la nivel național cu tematică în patologia cutanată.
Este membru în Colectivele de redacție și Editor pentru reviste internaționale: Recent Patents in Biomarkers, Journal of Immunoassay and Immunochemistry World Journal of Methodology, South East European Journal of Immunology, Trends in Toxicology and Related Sciences, Current Biomarkers, Journal of Gastrointestinal and Liver Diseases, Journal Health Politics, Bio-interactions and Bio-compatibility – Frontiers in Biomaterials Science, Journal of Cellular and Molecular Medicine.
Editor invitat pentru numere speciale din revistele internaționale: Disease Markers, Journal of Immunology Research, Molecules, Current Opinion in Toxicology, Journal Nanomaterials, International Journal of Molecular Sciences, Journal of Personalized Medicine, Frontiers in Bioengineering and Biotechnology.
Este co-inventator pentru 10 brevete în domeniul dermato-oncologiei, seturi de biomarkeri in dermato-oncologie, metode de separare molecule cu funcție imună, obținere clone de celule tumorale. Brevetele au fost premiate la târguri internaționale de invenții si inovații.
Autor a 29 de cărți si capitole de cărți internaționale și a peste 250 de articole științifice internaționale, Hirsch Index = 38 (ISI web of Science/Clarivate).